徐德强，王英明，肖义平。真菌接合孢子囊的形成及特征观察实验的改进探索。实验技术与管理，2010，27（3）：36-38。.pdf

ＩＳＳＮ１００２－４９５６．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． — — ．．．．．．．．．．．． — 第２７卷 — ＣＮ１１— ２０３４／ＴＶｏ１．２７第３期Ｎｏ．３２Ｏ１Ｏ年３月Ｍａｒ．２０１０真菌接合孢子囊的形成及特征观察实验的改进探索徐德强，王英明，肖义平（复旦大学生命科学学院，上海验Ｌ实．帆ｅｐ … 蓦摘２００４３３）要：真菌接合孢子囊的形成及特征观察是微生物学实验教学内容之一。采用蓝色犁头霉 “＋”和 “一 ” 菌株为实验菌种（取代以往常用的匍枝根霉），并以“八 ”字型划线接种，同时拍摄了该菌种形成接合孢子囊的５个生长阶段典型特征的显微镜照片用于实验教学，不但减轻了以往匍枝根霉孢囊孢子等易污染实验室环境的现象，也避免了该菌种对培养温度较敏感、常易引起实验结果不理想的状况。同时使学生知识学得技更活、更扎实，并对培养学生创新意识也具有一定的指导意义，因而提高了该实验教学的效果，受到学生的术欢迎。关键词：真菌；蓝色犁头霉；接合孢子囊；实验与ｄ中图分类号：Ｑ一３３１文献标志码：Ａ文章编号：１００２—４９５６（２０１０）０３００３６０３管№ 理ｅＩｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔｏｆｃｈａｒａｃｔｅｒｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｏｆｆｏｒｍａｔｉｏｎｐｒｏｃｅｓｓ０±ｚｙｇｏｓｐｏｒａｎｇｚ．ｕｍｉ ● ｎＦ一ｕｎｇｉａｎｄａｎａｎａｌｙｓｉ一ｓｏｎｉ ● ｔｓｔｅａｃ‘ ｈｉ · ｎｇｅｆｅｃｔＸｕＤｅｑｉａｎｇ，ＷａｎｇＹｉｎｇｍｉｎｇ，ＸｉａｏＹｉｐｉｎｇ（ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＩｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＦｕｄａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２００４３３，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｈｅｃｈａｒａｃｔｅｒｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｏｆｆｏｒｍａｔｉｏｎｐｒｏｃｅｓｓｏｆｚｙｇｏｓｐｏｒａｎｇｉｕｍｉｎＦｕｎｇｉｉｓｏｎｅｏｆｔｅａｃｈｉｎｇｃｏｎｔｅｎｔｓｉｎｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．Ｔｈｅ“＋ ” ａｎｄ ”一 ” ｓｔｒａｉｎｓｏｆＡｂｓｉｄｉａｃｏｅｒｕｌｅａｗｅｒｅｓｅｌｅｃｔｅｄａｓｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓｐｅｃｉｅｓ，ｉｎｓｔｅａｄｏｆＲｈｉｚｏｐｕｓｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒ，ｆｒｅｑｕｅｎｔｌｙｕｓｅｄｂｅｆｏｒｅ．Ｔｈｅｎ，ＦｕｎｇｉｗｅｒｅｉｎｏｃｕｌａｔｅｄｂｙｓｔｒｅａｋｉｎｇｐｌａｔｅｓａｃｃｏｒｄｉｎｇｔＯｔｈｅｓｈａｐｅｏｆ“八 ”．ＳｏｍｅｍｉｃｒｏｇｒａｐｈｓｗｅｒｅｔａｋｅｎｔＯｓｅｒｖｅｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｔｅａｃｈｉｎｇ．Ｔｈｅｓｅｍｉｃｒｏ— ｇｒａｐｈｓｄｅｓｃｒｉｂｅｄｔｙｐｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｓｏｆ５ｇｒｏｗｔｈｐｈａｓｅｓｔｈｒｏｕｇｈｗｈｉｃｈｔｈｉｓｓｐｅｃｉｅｓｆｏｒｍｅｄｚｙｇｏｓｐｏｒａｎｇｉｕｍ．ＴｈｉｓｗｉｌｌｄｅｃｒｅａｓｅｔｈｅｐｏｌｌｕｔｉｏｎｐｈｅｎｏｍｅｎｏｎｃａｕｓｅｄｂｙｕｓｉｎｇｓｐｏｒａｎｇｉｏｓｐｏｒｅｏｆＲｈｉｚｏｐｕｓｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒ，ａｎｄａｌｓｏａｖｏｉｄｔｈｅｓｉｔｕａｔｉｏｎｉｎｗｈｉｃｈｔｈｉｓｓｐｅｃｉｅｓｉｓｈｙｐｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｅｔｏｃｕｌｔｕｒａｌｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ｒｅｓｕｌｔｉｎｇｉｎｂａｄｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｒｅｓｕｌｔ．Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ，ｔｈｉｓｗｉｌｌｇｉｖｅｓｔｕｄｅｎｔｓａｌｉｖｅｓｔｕｄｙａｎｄｍａｋｅｔｈｅｍｈａｖｅｇｒｅａｔｂａｓｉｃｋｎｏｗｌｅｄｇｅ．Ｉｎａｄｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｉｓｉｓｈｅｌｐｆｕｌｆｏｒｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇｓｔｕｄｅｎｔｓ’ ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅｃｏｎｓｃｉｏｕｓｎｅｓｓ．Ｔｈｉｓｐｒｏｃｅｓｓｈａｓｒｅｃｅｉｖｅｄｍｕｃｈｗｅｌｃｏｍｅｆｒｏｍｓｔｕｄｅｎｔｓｂｅ — ｃａｕｓｅｏｆｅｎｈａｎｃｉｎｇｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｔｅａｃｈｉｎｇｅｆｆｅｃｔ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｆｕｎｇｉ；ａｂｓｉｄｉａｃｏｅｒｕｌｅａ；ｚｙｇｏｓｐｏｒａｎｇｉｕｍ；ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ真菌接合孢子囊的形成及特征观察是高校微生物的皿盖上常存在菌丝及大量孢子囊、孢囊孢子等生长学实验之一，通常采用匍枝根霉为实验菌种（少数学校物，观察该菌特征时易污染实验室环境。对此，我们选也采用蓝色犁头霉，但其教材中介绍内容极为简单，更用蓝色犁头霉“＋”和“一”菌株为实验菌种，并以“八 ” 无“八 ”字型划线接种及蓝色犁头霉“十 ”、 “一”菌株形字型划线接种进行了该菌种接合孢子囊形成及特征观成接合孢子囊的５个生长阶段典型特征的显微镜照察的探索，并取得了很好的教学效果。片）２１－４￣，但该菌生长对温度很敏感（有性生殖在２３～２５℃ ），温度稍高实验结果常不理想。同时培养该菌收稿日期：２００９—０３３１基金项目：国家基础科学人才培养基金项目（ＪＯ６３Ｏ６４３）作者简介：徐德强（１９５１），男，上海市人，大学本科，副教授，研究方向：环境微生物学．１方法１．１接种培养采用蓝色犁头霉 “＋”和 “一”菌株为实验菌种，并以“八 ”字型划线接种马铃薯葡萄糖琼脂平板，并将此平板置于２５～２８℃恒温箱培养４～５ｄ。徐德强，等：真菌接合孢子囊的形成及特征观察实验的改进探索１．２特征观察１．２．１肉眼观察一般接种第２ｄ就能观察到平板上“＋”和“一”菌株的菌丝各自向两侧生长现象，而当培养至４～５ｄ时可见到异性菌株问有一条黑色的接合孢子囊带。１．２．２显微镜观察（１）培养物直接观察。打开皿盖，在接合孢子囊带上压一块载玻片，轻轻按一下，使载玻片贴近接合孢子囊层，然后将此平板生长物直接置于显微镜载物台上观察接合孢子囊带不同部位，以了解蓝色犁头霉 “＋”和“一”菌株形成接合孢子囊的过程。（２）培养物制片观察。用无菌解剖针挑取蓝色犁头霉 “＋”和“一”菌株所形成的接合孢子囊不同部位的图１蓝色犁头霉 “＋ ”和 “一 ”菌株在马铃薯葡萄糖生长物和乳酸苯酚液等制作临时封片，然后用显微镜琼脂平板上所形成的接合孢子囊带观察蓝色犁头霉 “＋”和 “一”菌株形成接合孢子囊及其生长不同阶段的特征。图１表明，在蓝色犁头霉有性生殖后期可见到 “＋ ”和２结果 “ 一（２）蓝色犁头霉“＋”和 “一”菌株形成接合孢子囊（１）蓝色犁头霉 “＋”和“一”菌株在马铃薯葡萄糖的过程见图２。琼脂平板上所形成的接合孢子囊带见图１。（ａ）原配千囊的形成（ｃ）质配、核配 ”菌株生长物间有一条黑色的接合孢子囊带。（ｂ）配子囊的彤成（ｄ）幼接合孢予囊（ｅ）成熟的接合孢子囊图２蓝色犁头霉接合孢子囊形成过程特征图图２展示了蓝色犁头霉有性生殖形成接合孢子囊的５个生长阶段的典型特征，即原配子囊的形成（图中两原配子囊间有横壁）一配子囊的形成（每个原配子孢子囊（暗黑色球形）。３教学效果分析囊产生横壁将原配子囊分为两部分，横壁前端为配子（１）作者采用蓝色犁头霉 “＋”和 “一”菌株为实验囊，另一端为配子囊柄）一质配、核配（两个配子囊中间菌种，并采用 “八 ”字型划线接种方法，使学生在同一时横壁消失）一幼接合孢子囊（未膨大）一成熟的接合间观察到该菌接合孢子囊形成的不同生长阶段特征，３８实验技术与管理既节省了实验观察时问，又利于教师对实验时间的和 “ ”菌株形成接合孢子囊的５个生长阶段的典型特安排。征的显微镜照片，属国内首见（２）由于采用蓝色犁头霉 “＋ ”和 “一 ”菌株为实验菌种，从而在实验结果观察过程中明显减轻了实验菌种孢子囊及孢囊孢子等对实验室环境的污染。（３）由于蓝色犁头霉 “＋ ”和 “一 ”菌株形成接合孢子囊的培养温度较宽（２５～２８℃为较适宜），即使温度下降至２３℃或上升至３０℃ ，对实验结果也无太大影响，因而实验成功率也得到明显提高。（４）以往高校中普遍采用匍枝根霉为实验菌种，其形成接合孢子囊的几个生长阶段的特征至今也仅有从国外相关文献中引入的人工绘制的示意图一。而作者拍摄的蓝色犁头霉 “＋”和“一”菌株形成接合孢子囊５个生长阶段典型特征的显微镜照片非常便于学生，国外罕见］，对培养学生创新意识也具有一定的指导意义。参考文献（Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ）：［１］周德庆．微生物学实验教程［Ｍ］．２版．北京：高等教育出版社，２００６．：２］赵斌，何绍江．微生物学实验［Ｍ］．北京：科学出版社，２００２．３］钱存柔，黄仪秀．微生物学实验教程［Ｍ］．北京：北京大学出版社，１９９９．４］闵航．微生物学实验教程［Ｍ］．杭州：浙江大学出版社，２００５．：５阿历索保罗ｃＪ．明斯ＣＷ，布莱克米尔Ｍ．菌物学概论Ｆ－Ｍ］．４版．姚建．李玉主．译．北京：中国农业出版社．２００２．：６］阿历索保罗（、Ｊ．明斯ＣＷ．真菌学概论Ｍ］．３版．余永年，宋大康，译．北京：ｌ｛］围农、出版社，１９８３．：７］裘维蕃．菌物学大全［Ｍ］．北京：科学出版社，１９９８．结合详细文字介绍、对照实物进行特征观察，学生不但８］邢来君，李明春．普通真菌学：Ｍ］．北京：高等教育出版社，１９９９．兴趣大增，而且也使学生学知识学得更活、更扎实，实：９］刘志恒．现代微生物学［Ｍ］．２版．北京：科学出版社，２００８．验教学效果很好。：１０］ＷｅｂｓｔｅｒＪ．ＷｅｂｅｒＲＷＳ．Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎｔｏｆｕｎｇｉ［Ｍ］．３ｔｈｅｄ．（５）作者拍摄并用于实验教学的蓝色犁头霉 “＋ ” Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ：ＣａｍｂｒｉｄｇｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＰｒｅｓｓ．２００７．（上接第３５页）ｔｅｎｓｉｌｅｓｐｅｃｉｍｅｎｕｓｉｎｇｃｏｍｐｕｔｅｒｖｉｓｉｏｎａｎｄｄｉｇｉｔａｌｉｍａｇｅｃｏｒｒｅｌａ［６］ＭｕｒａｔａＫ．ＭａｓｕｄａＭ．Ａｎａｌｙｓｉｓｏｆｓｔｒａｉｎｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆｓｏｆｔｗｏｏｄｌｉｏｎ．Ｐａｒｔ１：ｄａｔａａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎａｎｄｉｍａｇｅａｎａｌｙｓｉｓｓｙｓｔｅｍ［ｊ］．ＴａｐｉｎｔｒａｎｓｖｅｒｓｅｃｏｍｐｒｅｓｓｉｏｎｍｅａｓｕｒｅｄｂｙｄｉｇｉｔａｌｉｍａｇｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄＪ．Ｚａｉｒｙｏ／＇ＪｏｕｒｎａｌｏｆｔｈｅＳｏｃｉｅｔｙｏｆＭａｔｅｒｉａｌｓＳｃｉｅｎｃｅ，２００３，５２（４）：３４７３５２．［７］ＢｒｕｅｋＨＡ．ＭｅＮｅｉｌｌＳＲ．ＳｕｔｔｏｎＭＡ，ｅｔａ１．Ｄｉｇｉｔａｌｉｍａｇｅｃｏｒｒｅ— ｌａｔｉｏｎｕｓｉｎｇＮｅｗｔｏｎ— — Ｒａｐｈｓｏｎｍｅｔｈｏｄｏｆｐａｒｔｉａｌｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｃｏｒｒｅｃ— ＿ｔｉｏｎ［Ｊ．ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＭｅｃｈａｎｉｃｓ，１９８９，２９（３）：２６１ — ２６７．［８］ＷｅｉＴｏｎｇ．ＡｎｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｄｉｇｉｔａｌｉｍａｇｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｃｒｉｔｅｒｉａｆｏｒｓｔｒａｉｎｍａｐｐｉｎｇａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓＪ］．Ｓｔｒａｉｎ，２００５，４１（４）：１６７ｌ７５．［９］ＣｈｕＴＣ，ＲａｎｓｏｎＷＦ，ＳｕｔｔｏｎＭＡ，ｅｔａ１．Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓｏｆｄｉｇｉｔａｌ — ｉｍａｇｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓｔｏｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｍｅｃｈａｎｉｃｓ［Ｊ］．Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａ１Ｍｅｃｈａｎｉｃｓ．１９８５，２５（３）：２３２２４４．［１Ｏ］ＡｈｈｏｆＲＪ，ＷｉｎｄＭＧＪ，ＤｏｂｂｉｎｓＪＴ．Ｒａｐｉｄａｎｄａｕｔｏｍａｔｉｃｉｍａｇｅｒｅｇｉｓｔｒａｔｉｏｎａｌｇｏｒｉｔｈｍｗｉｔｈｓｕｂｐｉｘｅｌａｃｃｕｒａｃｙ［Ｊ］．ＩＥＥＥＴｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓｏｎＭｅｄｉｃａｌＩｍａｇｉｎｇ，１９９７，１６（３）：３０８３１６．［１１］ＨｏｕＺｈｅｎｄｅ，ＱｉｎＹｕｗｅｎ，Ａｓｔｕｄｙｏｆｆｒａｃｔａｌｉｎｔｅｒｐｏｌａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ［Ｃ］／／ＴｈｅＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＳｏｃｉｅｔｙｆｏｒＯｐｔｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，２００１：３８６—３８９．［１２］ＳｕｔｔｏｎＭｉｃｈａｅｌＡ．ＣｈａｏＹＪ．ＭｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｏｆｓｔｒａｉｎｓｉｎａｐａｐｅｒｐｉＪｏｕｒｎａｌ，１９８８．７１（３）：１７３１７５．：１３］ＳｃｈｒｅｉｅｒＨＷ，ＢｒａａｓｃｈＪＲ，ＳｕｔｔｏｎＭＡ．Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃｅｒｒｏｒｓｉｎｄｉｇ— ｉｔａｌｉｍａｇｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｃａｕｓｅｄｂｙｉｎｔｅｎｓｉｌｙｉｎｔｅｒｐｏｌａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＯｐｔｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，２０００，３９（１１）：２９１５－２９２１．：１４］ＺｈａｎｇＤｏｎｇｓｈｅｎｇ，ＡｒｏｌａＤ．ＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓｏｆＤｉｇｉｔａｌＩｍａｇｅＣｏｒｒｅ［ａｔｉｏｎｔｏＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＴｉｓｓｕｅｓ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｍｅｄｉｃａｌＯｐｔｉｃｓ，２００ｉ．９（４）：６９１６９９．１５］ＺｈａｎｇＤ．ＥｇｇｌｅｔｏｎＣＤ，ＡｒｏｌａＤ．ＥｖａｌｕａｔｉｎｇｔｈｅＭｅｃｈａｎｉｃａｌＢｅ — 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